轉(zhuǎn)基因動物品系的構(gòu)建,往往會用到PCR或qPCR技術(shù)。這類核酸檢測技術(shù),不僅能用于鑒定物種,還能用于微生物的檢測。德國MB生產(chǎn)的qPCR支原體檢測試劑盒,靈敏度高、特異性強(qiáng),通過藥典的方法學(xué)驗證。同時還有配套的支原體檢測標(biāo)準(zhǔn)品和支原體DNA提取試劑盒,同時完成了歐洲藥典和日本藥典的方法學(xué)驗證。
哺乳動物呼吸鏈復(fù)合體I, iiii和IV (CI, CIII2和CIV)對細(xì)胞生物能量學(xué)至關(guān)重要,并形成一個穩(wěn)定的組裝體,即呼吸小體(CI-CIII2-CIV),這在生化和結(jié)構(gòu)上都有很好的記載。
呼吸小體在生物能量學(xué)和代謝調(diào)節(jié)中的作用受到激烈的爭論,并且難以研究,因為個體呼吸鏈復(fù)合物與高水平的呼吸小體共存。
為了嚴(yán)格研究呼吸小體在體內(nèi)的作用,研究人員構(gòu)建了純合子敲入小鼠,這些小鼠具有正常水平的呼吸鏈復(fù)合物,但呼吸小體水平顯著降低。令人驚訝的是,突變小鼠是健康的,具有保留的呼吸鏈能力和正常的運動表現(xiàn)。
研究結(jié)果表明,高水平的呼吸小體對于維持小鼠的生物能量和生理是很重要的,但對它們的其他功能提出了疑問,例如與蛋白質(zhì)穩(wěn)定性調(diào)節(jié)和預(yù)防年齡相關(guān)的蛋白質(zhì)聚集有關(guān)的功能。
研究總結(jié):
•復(fù)合物III2 UQCRC1中的三個氨基酸(EED)控制呼吸小體的穩(wěn)定性
•純合子Uqcrc1delEED敲入小鼠顯著降低了呼吸體水平
•呼吸小體的嚴(yán)重耗竭不會損害氧化磷酸化
•呼吸小體嚴(yán)重衰竭的小鼠具有明顯正常的生理機(jī)能