来一水AV@lysav|无码人妻少妇伦在线电影|国产亚洲欧美日韩二区|白嫩少妇激情无码

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作步驟-胎牛血清來助力!

細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作步驟-胎牛血清來助力!

更新時間:2021-10-13  |  點擊率:993

原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后,需要進(jìn)行分離培養(yǎng),否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株),可以進(jìn)行細(xì)胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的最大利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。

1. 操作步驟

(1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。

(2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜。

(3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進(jìn)行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在 倒置顯微鏡 下進(jìn)行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化。

(4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化。

(5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細(xì)胞。

(6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

(7) 細(xì)胞培養(yǎng) 換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。

2. 注意事項

(1)掌握好細(xì)胞消化的時間,消化時間過短時,細(xì)胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷。

(2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細(xì)胞消化時間相對延長。

科研實驗中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。

Ausbian®特級胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個批次附有詳細(xì)完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實驗人對于新批次血清,應(yīng)認(rèn)真審閱《檢測報告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測報告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費(fèi)幫助。)

它在國內(nèi)市場經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶反復(fù)選擇,也是細(xì)胞典藏等重大項目十幾年的供應(yīng)品牌.


无码精品AV久久久奶水| 国产精品久久久久久综合日本| 久久大香伊人在线线| 国产精品丝袜久久久久久不卡| 欧美日本国产va高清cabal| 国产+成+人+亚洲欧洲自| 69视频在线看中文在线观看不卡| 午夜一区二区三区av| 国产99久久九九精品无码| 啊轻点灬太粗嗯太深了用力| 国产丝袜久久久久一区二区三区| 久久久久久精品国产尤物| 在线观看亚洲AV日韩AV| 国产内射老熟女AAAA| 人人妻人人澡人人爽人人精品| 丰满雪白人妻人爽AV精品| ass日本少妇高潮pics| av日韩在线观看一区二区三区| 苍井そら无码av| 国产又爽又猛又粗的视频A片| 欧美ZC0O人与善交另类A片| 国产成人久久精品亚洲| 51国偷自产一区二区三区| 日本无遮挡边做边爱边摸| 与子敌伦刺激对白播放| 国产精品久久久久久久影视一免费| 久久综合亚洲色HEZYO国产| 精品久久国产一区二区| 一边吃奶一边添P好爽故事| 亚洲av一二三在线观看| 亚洲精品国产精品制服丝袜| 丰满熟妇乱又伦| 国产精品久久久久久亚洲调教| 久久久精品久久久精品999| 亚洲AV无码乱码国产麻豆| 被黑人伦流澡到高潮HNP动漫| 七十路熟女交尾HD| 99久久亚洲精品无码毛片| 日韩一级毛一片欧美一级| 乱子伦XXXX LOCALHOST| 免费人成视频在线观看网站|