有些實驗人員報告,細胞培養(yǎng)時在鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點。
這是有污染嗎?應(yīng)如何處理?
一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,可采取下列步驟:
首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,
然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。
如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應(yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;
(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
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